mRNA的提取及分离纯化方法
关于 mRNA 及整体柱
mRNA 具有大分子质量，也对剪切力敏感。
整体色谱柱的大通道结构允许大分子自由进入，并且层流可防止剪切力损伤。
整体柱结构能够纯化高达 10 kb 或更大的 mRNA。
mRNA 丰富的化学性质是纯化色谱柱多样化选择的基础。
mRNA 含有带电的磷酸酯主链和具有氢键能力的疏水核苷酸残基。
电荷相互作用，氢键和其他分子作用力也带来了挑战。
mRNA 充当成核中心，并容易与IVT混合物中的其他组分形成缔合。
这些杂聚体降低了传统已知纯化方法（包括过滤，沉淀和色谱法）的容量，回收率和纯化能力。
BIA Separations 可以提供，专用于大分子纯化的创新型层流设计整体柱，mRNA 纯化工具包，灵活、快速、方便地使用整体色谱柱，以获得您所需的高质量产品。
工具包概述
CIM 技术提供了功能独特的纯化工具包，可用于快速过程开发和规模扩大：
产品具有完整的 poly（A）尾
dsRNA 和 DNA template 被去除
去除了与过程和产品相关的杂质，如酶、DNA 和 RNA 片段
一、CIMmultus Oligo dT
提供了 mRNA 的一步亲和捕获。
通过氢键结合，oligo dT 与目标物的末端 poly(a) 序列形成稳定的杂化结合。
样品上样期间，非 RNA 污染物流穿色谱柱。
二、CIMmultus C4 HLD
是疏水性层析整体，用于纯化核酸。
样品以高离子强度应用于沉淀 RNA 的盐中。
大多数 DNA，dsRNA 和 short transcripts 的洗脱时间要早于完整的 ssRNA。
通常通过 NaOH 清洗步骤洗脱蛋白质和聚集体。
三、CIMmultus PrimaS
在室温和水相条件下纯化大单链 mRNA（ssRNA）。
可以用于抛光或高分辨率捕获方法。
可以去除 dsRNA，DNA，蛋白质和内毒素，同时按大小递增的顺序对 ssRNA 进行分级分离。
四、CIMmultus SDVB
是用于纯化 ssRNA 的基于苯已烯已烯基苯的反相色谱柱。
DNA，dsRNA 和 ssRNA 根据长度进行分级。
长度相似的双链和单链物质分离的选择性受碱基配对程度的影响
SDVB 和 PrimaS 可用于评估。
五．定制专属于你的固定相配体
我们的研发可以固定定制的寡核苷酸序列，蛋白质或酶。
定制和专有的寡核苷酸序列可以提高产物的纯度，并且可以固定在整体基质上。
固定化酶可以减少酶的使用和成本，消除酶的去除步骤，并提高消化效率。