【探索】感染症状明显，常规细菌培养阴性，很可能是这个原因
疑点
当临床上遇到细菌感染症状明显而标本常规细菌培养阴性者，应考虑细菌L型感染的可能性，宜作L型的专门分离培养，并更换抗菌药物。
简介
L型是细菌、真菌等微生物在某些情况下，如：受溶菌酶和青霉素的作用，细胞壁被破坏或其合成受到抑制，部分细菌扔保持一定的生命力，成为细胞壁缺陷的细菌，即为细菌L型。
L型细菌对β-内酰胺酶和其它作用于细胞壁的抗生素具有抵抗力，其形态、染色性、培养特性及生化反应均与原菌有明显的差别，故需要特别的培养和特别的抗生素治疗。
细菌L型的培养
一、制作培养基：由于其胞质内含有高浓度的蛋u白质与无机盐，渗透压很大，在低渗环境容易肿胀破裂，故在普通培养基上不生长，需要高渗环境才可。L型培养基制作如下：
1、在牛肉浸液或脑心浸液中加入10g/L-20g/L蛋白胨，40g/L-50g/L氯化钠，150g/L蔗糖。
2、固体培养基可再加入8g/L-10g/L琼脂，调整PH至7.6-7.8,103.43kPa灭菌20min。
3、待冷至50℃-60℃时加入20%无菌马、羊或人血浆。
二、分离培养：
1、对于不能及时接种的标本应加入等量200g/L蔗糖无菌溶液或其它高渗液体培养基保存。
2、血液、骨髓、穿刺液：先高渗肉汤增菌，当有浑浊或沉淀后，再取100ul接种在L平板和血平板上。
3、胸腹水、脑脊液、尿液：除采取上述方法外，也可直接取100ul标本接种。
4、痰、脓液等：直接将标本接种于L平板和血平板上。以上均置于35℃培养1-7d。
细菌L型的检查或鉴定
一、革兰染色：
多为革兰阴性、形态不一的彭大杆状菌、长丝体、圆球体及巨球体等，有明显的多形性。
二、菌落特点：
在培养2-7d后，于低倍镜下观察，可见三种类型：
1、油煎蛋样（典型L型）：菌落较小，中心致密并深陷培养基，透光度差，四周较薄，由透明颗粒组成。
2、颗粒型（G型）：整个菌落均由透明颗粒组成，无致密的核心。
3、丝状菌落（F型）：菌落中心同L型，周边为透明丝状。
三、返祖试验：
临床分离的L型菌常在做药敏试验时即可返祖，即取菌接种牛肉汤，35℃培养24h后，取菌液划线接种牛肉汤琼脂或L型平板，培养后涂片染色镜检，如此反复传代返祖变为原来典型的形态为止。
只有符合上述三点，才可确定是细菌L型。所以对标本仅做涂片观察其多形性是不可靠的。
细菌L型的临床意义
细菌L型在机体形成后，可在各组织或细胞潜伏，大多标本均可分离出L型。其感染的临床表现无明显特异性，多呈慢性迁延、反复发作，如尿路感染、心内膜炎等，并常在应用某些抗菌药物（β-内酰胺酶类等抗生素）治疗过程中出现。
治疗：
1、头孢菌素有时仍敏感，因其对细胞膜也作用，常可使用一些作用于细胞膜的抗生素，如大环内脂类和氨基糖苷类。
2、结核菌L型对链霉素、红霉素、诺氟沙星和氧氟沙星敏感。
3、多粘菌素更易渗入，作用于细胞膜上的磷脂。
