逆转录病毒技术原理及特点
逆转录病毒(Retrovirus) 来源于可感染人和小鼠细胞的 Moloney鼠白血病病毒(Mo-MLV),和慢病毒一样是一种RNA病毒。这类病毒通过逆转录成为原病毒,然后整合在宿主的基因组中,随着细胞分裂可以稳定的遗传下去。因此。逆转录病毒适合介导外源基因在宿主细胞中长期稳定表达。但逆转录病毒又有自己的特点:比如,逆转录病毒只有感染分裂细胞的能力,如胚胎干细胞、神经干细胞、造血干细胞及血液系细胞(系)等,除了适合体外细胞系的感染,也常用来在体示踪分裂细胞如神经干细胞等。
逆转录病毒特点
● 高效感染免疫系统和造血系统等来源的可分裂型细胞;
● 病毒感染具有人鼠细胞特异性;
● 可用来构建稳转系;
T细胞专用逆转录病毒感染实例:
细胞:小鼠原代CD4+ T细胞
刺激方式:CD3/CD28抗体和IL-2激活48 h
病毒:T细胞专用逆转录病毒mTRv-GFP,1×108 TU/ml,MOI=100
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