例析母种培养基并论配方设计(4)
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十、给母种培养基一些另外的基本概念
对于菇种因特性而需要的专用培养基的研究,必须基于菇种的自然属性特点,过分滥用速效营养得到的快速生长配方,一定存在另一个问题,那就是菌丝体的老化加快。所以在生产上应用,不会纯粹考虑菌丝生长速度,也因此,很多实验室里研究出来的所谓最佳配方没有应用价值。另一方面,如果使用这样的高速配方,接入原种的时候,应该更为注重菌龄的掌握。
所有培养基(不限母种)的基本定性,除了成分之外,都要通过观察生长和保存两方面性能来界定。
成分特性一方面是要界定物质比例特征:如高糖、高氮、高盐等。另一方面要界定化学特征如酸性培养基、偏酸培养基、中性培养基、偏碱性培养基等。还有就是特征性添加物,必要性添加物等。这些特征描述有助于探索新的原料类型,同时,也有优化培养基组分的参考价值。
根据实际运用,母种培养基除了繁殖用途之外,还有延续用途,比如是用于保藏、还是复壮、或者激活、或者分离,在配置培养基的时候都要有所考量。提高生长速度特性的培养基只能用于繁殖,而且还要注意营养过渡能力,有些快速生长的培养基制作的菌种不容易在原种培养基上面定植,这样的培养基就没有应用价值,但可以考虑利用其成分结构加强到定植能力强的培养基里面。
定植能力是观察母种培养基性能的一个重要指征,定植能力好的培养基一定是优良的生产应用培养基。
萌发能力是观察母种培养基性能的另一个指征,萌发能力好但定植能力差的培养基,就不能用于生产。但是,萌发能力是很容易变化的,这就是抗老化能力差异,如果萌发能力变化大而且快,说明培养基特性是不耐老化的。
最佳的培养基必须既有快速萌发的能力又有很强的定植能力。
本例的内容对于菌种的表现,评价体系没有包括萌发表现和定植表现,所以,这个研究的应用价值同样不高,还有待更多观察重复才能评价,当然保存方面,这个研究更没有涉及。
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十一、干扰因素分析
无机盐过量导致的pH值过低,对于整个实验结果影响,是最大的干扰因素。由于配方5(文章结论最佳)的pH值受到大量麦麸煮出物特别是淀粉的缓冲,相对来说更为接近大球盖菇的最佳pH值,所以表现自然比较好。而这方面配方1的菌丝显然被较低的pH值(偏离最佳较远,甚至可能接近不宜)所抑制,虽然蛋白胨添加量较大,但蛋白胨本身也是偏酸性的,所以它里面的有机物缓冲作用效果不明显。
因此,这个结果表面看是氮源物质的差异,实际上出现了较大的pH值差异,那就是对比基础存在不一致,所以实验结果就不能体现本质结论。
另一个重要的干扰因素干物质总量,配方6与配方1相差甚大,因为母种培养基不存在含水量问题,表面看似乎没有问题,但实际上演变成为小分子营养物质比例的大差异,其中主要差异在于可溶性氨基酸。
因为200g马铃薯是含较多水的,而200g麦麸含水量就很少了,这个干物质的大量差异,很大程度上构成了煮出液里面可溶性氨基酸和可溶性单糖类的大差异,而因为糖分存在5%的基础用量,影响就不突出了。
这两个干扰带来的问题,使得试验结果不可信,在某种程度上也是配方2、3、4、不如配方5的原因之一。
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十二、副作用
本例的总干物质量非常恐怖,这是培养基研究里几乎很难看到的状况。除高糖培养基之外,无论做什么研究,母种培养基的总干物质量一般控制在5-10%范围。过多的干物质根本没有可能利用,但在菌丝生长一定程度后,各种胞外酶的存在,会使这些物质出现分解变化,产生一些有机酸等,这样又存在加速菌丝老化,恶化菌丝体pH值环境等问题,以及转接后的抗杂能力下降等不良作用。
实际上对于萌发定植的不良影响,也是存在的。
(待续)