开展免疫组化试剂、设备

一、试剂

1、PBS：0.01M磷酸盐缓冲液 (pH7.4)

取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na₂HPO₄·12H₂O 3.63g或Na₂HPO₄1.44g， KH₂PO₄ 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。

2、固定液：4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液(pH7.4)

（1）0.1M磷酸盐缓冲液：取A液400ml与B液80ml混合后，调pH于7.4，再定容至500ml

A液：0.1mol/L Na₂HPO₄（Na₂HPO₄·12H₂O 35.8g加水定容至1000ml）

B液：0.1mol/L NaH₂PO₄（NaH₂PO₄·2H₂O 15.6g加水定容至1000ml）

（2）4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液：取20g多聚甲醛溶于500ml 0.1M磷酸盐缓冲液中，加热并搅拌约2-3h后溶解

3、梯度酒精：100%、95%、80%、70%、50%

4、二甲苯

5、包埋剂：石蜡

6、防脱剂：多聚赖氨酸（PLL5g+蒸馏水1000ml）、APES（3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷）

7、抗原修复液：0.01M枸橼酸缓冲液（PH 6.0），或0.01M柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）

取A液8ml与B液42ml混合后加水至400ml，调pH于6.0，再定容至500ml

A液：0.1mol/L 柠檬酸（C₆H₈O₇·H₂O 21.01g加水定容至1000ml）

B液：0.1mol/L 柠檬酸钠（Na₃C₆H₅O₇·2H₂O 29.41g加水定容至1000ml）

8、SP超敏免疫组化试剂盒（包括试剂A、B、C、D）

试剂A -- 阻断剂：3%甲醇-H₂O₂溶液（30%H₂O₂和80%甲醇溶液配制）

试剂B -- 封闭液：正常非免疫动物血清

试剂C -- 二抗（辣根过氧化物酶标记）

试剂D -- SP（链霉亲和素-过氧化物酶）

9、一抗（特异结合底物）

10、显色剂：DAB试剂盒、苏木素染液

11、封固液：中性树胶

二、设备

恒温箱（水浴锅）、冰箱、通风橱、切片机、黏附载玻片和盖玻片、高压锅或微波炉、染色缸、显微镜、计算机图像分析系统。

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衡道医学

知势而为 成人达己

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