小鼠原代细胞分离提取实验技术介绍

原代细胞(Primary cells)是指来源活体组织,经特定分离方法制备而成的初始细胞。原代细胞离体时间短且不经过永生化过程,其生物学特性未发生很大变化,仍保持原有的遗传特征,可更好地反映细胞在体内的生长状态,从而获得与体内生理功能更接近的数据。

基因敲除小鼠原代细胞提取的应用

从某个特定基因敲除(Knock out,KO)小鼠的特定组织中提取原代细胞,则可直接得到目的基因不表达的原代细胞模型,且与我们在KO小鼠上的研究具有更好的承接性,从而让我们想要证实的实验目的更具有说服性。

近年来,多个发表在高分期刊如Scientific Reports的文章均有采用KO小鼠的原代细胞进行实验验证的案例。另外,KO小鼠的原代细胞还可用于细胞水平的药物筛选、药物评价等方面。

(0)

相关推荐

  • 中国科学家精准“删除”动物特定记忆

    近日,我國科学家利用基因编辑技术,在实验大鼠的脑中实现特定记忆的精准删除.此项研究有望为慢性疼痛.成瘾等以"病理性记忆"为特征的疾病治疗提供新思路. 事件的记忆是由脑内一群&quo ...

  • siRNA对照解析

    A.普通阴性对照   1.siRNA实验应该有阴性对照: 2.通用阴性对照为与目的基因的序列无同源性的普通阴性对照: 3.Scrambled阴性对照和选中的siRNA序列有相同的组成,但是和mRNA没 ...

  • 原代细胞分离实验技术服务

    凡是来源于胚胎.组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞.人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,必须将现有的组织块充分散开, ...

  • 原代细胞分离常采用的方法

    原代细胞分离常采用的方法有以下两种: 一.悬浮细胞的分离法 1.将血液.羊水.胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/min的低速离心5分钟: 2.去掉上清,离心沉淀用无钙.镁的PBS清洗后 ...

  • 原代细胞的分离和制作方法

    人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,即使采用1mm3的组织块,也只有少量处于周边的细胞可能生存和生长,若需获取大量细胞,将现有的组织块充分散开,使细胞解 ...

  • 原代细胞的分离与培养实验怎么做?

    原代细胞是出了名的难养,对培养环境和实验操作的要求更苛刻.原代细胞在体外通常只能传代少数几次,某些原代细胞(如神经元细胞)甚至无法进行传代.对于研究人员来说,如何才能经济高效地培养好原代细胞,并围绕这 ...

  • 原代细胞介绍

    用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞.严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素, ...

  • 原代细胞永生化技术实验流程

    体外培养细胞在发育.组织维持与重塑.肿瘤发生机制.再生医学.新药开发等生命科学各研究领域中发挥了重要作用.原代细胞经过有限代数的增殖后通常会出现衰老死亡,因此生物学家需要不断地用组织重新进行原代培养以 ...

  • 原代细胞的培养与建系(二)

    ③酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为0.1%-0.25%(活力1:200或1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长.浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进 ...

  • 原代细胞制备与培养操作方法

    原代细胞制备与培养 将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶).螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存.生长和繁殖,麟美生物提原代培养服务 ...

  • 原代细胞与细胞系的区别?

    原代细胞生长缓慢,一般认为,原代细胞培养的第1代和传代到第10代以内统称为原代培养.原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长会出现停滞,大部分细胞衰老死亡.但是有极少数的细胞能够度 ...