大鼠急性肝损伤模型实验方法
一. 主要试剂及耗材:
8周龄雄性SD大鼠
对乙酰氨基酚
血生化仪
PBS
二. 实验方法:
正式实验开始前,大鼠禁食12h,然后对乙酰氨基酚组(即模型组)给予450mg/kg的对乙酰氨基酚溶液(用40℃生理盐水配制)灌胃,空白对照组则采用相等容量的生理盐水灌胃。
空白对照组:大鼠毛发光滑,好动,食欲佳;对乙酰氨基酚组(即模型组)大鼠精神萎靡,活动欠佳,食欲减退。
肝组织损伤程度病理学分级标准:0度(-):肝细胞、肝细胞索、肝窦均正常,未见肝细胞水肿或空泡的异常改变;1度(+):在一个肝小叶中,有1/3以内肝细胞水肿,中央静脉周围的肝细胞核浓染成黑色固缩,分布散在;2度(++):在一个肝小叶中,有1/3~1/2以内的肝细胞水肿,肝细胞明显疏松化,中央静脉周围出现点状坏死,分布较广,汇管区有少量炎细胞浸润;3度(+++):在一个肝小叶中,有1/2以上的肝细胞水肿,肝细胞气球样变,汇管区出现炎细胞浸润,点状坏死灶。
三. 实验结果
3.1 生化检测
图:各组ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL浓度
由上图可见,与正常组比,ALT、AST、ALP、TBIL和DBIL 造模后表达明显上升。其中ALT、AST和TBIL在24h小时后表达最高。ALP在1h 表达最高随后开始下降,36h表达最低。图中统计为实验组与正常组使用T检验进行统计比较。*表示 P<0.05;**表示P<0.01。
3.2HE检测
空白对照组大鼠肝脏组织结构正常,肝索呈放射状排列整齐,胞浆着色均匀,细胞核清晰。对乙酰氨基酚组可见肝小叶中央实质细胞碎片状坏死,肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞水肿,胞浆内空泡样变性;可见新生肝细胞,核仁明显,少数双核的新生肝细胞。小叶内可见炎症细胞浸润,其中以淋巴细胞为主,发生碎片状坏死病灶处炎症细胞浸润明显。
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