兔单克隆抗体构建技术服务介绍
兔抗体噬菌体展示库是兔源多克隆抗体和单克隆抗的优质来源,与杂交瘤技术相比,利用噬菌体文库技术制备的杂交瘤可以抗体基因的形式保存在噬粒载体上,结合不同蛋白表达系统的优势,如利用无细胞表达体系,可以实现无动物源生产并获得高特异性和高亲和力的重组单抗。兔单克隆抗体识别啮齿类和人体抗原共同的抗原决定簇能力要好于鼠类单克隆抗体,是因为兔和啮齿类动物中常用的大鼠、小鼠进化关系较远,啮齿类单克隆抗体对啮齿类和人体抗原共同的抗原决定簇不起作用,而兔抗体却可以很好的辨识啮齿类和人体抗原共同抗原决定簇,克服了抗体生产中这一障碍。
在噬菌体技术制备重组单抗过程中,我们通过将兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进入人源抗体骨架单价蛋白构建嵌合抗体库,以此避免Fab抗体片段对大肠杆菌的毒性。随后将筛选到的高特异性和高亲和力的兔源抗体可变区(Vλ, Vk, and VH)克隆进带有兔子抗体骨架蛋白的质粒载体,同时联合我们的蛋白重组表达平台进行瞬时表达(产量可达-5g/L)。
制备流程:
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