RNAi干扰技术实验流程

RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的过程。RNAi大体分为两步，首先起始RNA(dsRNA或miRNA初级转录本)经II型核酸酶Dicer和Drosha处理后变成短干扰RNA(siRNA)，之后siRNA装载至RNA诱导沉默复合体(RISC)，在RISC组装过程中siRNA展开成单链并与mRNA靶点杂交，通过RNA酶H对目的mRNA的降解最终实现目的基因沉默。RNAi作为一种快捷高效的基因表达抑制手段，在基因功能研究中发挥了重要作用。

　　利用慢病毒的基因组整合及高效表达特性，并通过特定筛选标记获得RNAi细胞系，能够实现持续、稳定、高效的RNA干扰。

　　技术优势

　　通过慢病毒感染可获得持续高表达shRNA细胞系，避免反复转染的复杂操作和不稳定性;

　　可根据需要选择不同的筛选标记。

　

　　实验流程