法国 Stilla Technologies 公司位于巴黎 Villejuif 生物园，成立于2013年，其产品 Naica 液滴数字 PCR 系统是目前市场上操作简便且唯一可实现多重检测的绝对定量数字 PCR 系统。
图 1
Naica 全自动液滴芯片数字 PCR 仪由专用耗材芯片，Geode 微滴生成扩增系统和 Prism3 液滴阅读分析系统组成。各部分手动操作时间及系统处理时间如下图所示。仅需 5 min 左右即可实现样品进结果出全自动流程。
图 2
Naica 全自动液滴芯片数字 PCR 仪具有以下优势:
操作 naica 系统需较少专业技术知识，仅需一步手动上样操作 ( 5 min )，即将反应液加入 Sapphire 芯片 或 Opal 芯片中。
图 3
Stilla 具有 Sapphire 高灵敏芯片 和 Opal 高通量芯片 两种。该芯片采用独特微流体技术将油相封装在芯片内部。Sapphire 高灵敏芯片具备 4 个样本孔， 一个样本孔可生成约 30000 个液滴。同时仅需 25 ul 的 水相，即 PCR 混合液。Naica 系统一次可同时操作 1-3 张芯片，即 1-12 个样本的检测。即在 2 个小时内满足一次检测 1-12 个病人的样本检测。
图 4 Sapphire 芯片
Opal 高通量芯片具备 16 个样本孔， 一个样本孔可生成约 20000 个液滴。同时仅需 7 ul 的 水相，即 PCR 混合液。Naica 系统一次可同时操作 1-3 张芯片，即 1-48 个样本的检测。即在 2 个小时内满足一次检测 1-48 个病人的样本检测。
图 5 Opal 高通量芯片
该仪器使得工作流程快速而简洁，在提供更高通量和检测灵敏度特异性的同时，缩短了检测时间、节省了宝贵的样品。
图 6
多重检测即在一个反应中同时检测出多种不同的基因，可以带来更全面和准确的检测结果。多重分子检测目前广泛应用于荧光定量 PCR (采用多色荧光进行多重检测)。naica 系统可在一个孔中读取多达三种荧光特征，即三重检测。在满足超高灵敏度和绝对定量基础上突破荧光通道限制，实现了多重检测。
图 7
在数字 PCR 中实现多指标的并行检测能显著降低检测成本，获取更丰富的检测信息。在一个 PCR 反应中完成基因多个突变位点的检测，即一个 PCR 反应即可完成一个 Panel 的检测，在医学领域有着不可替代的优势。如：
(1) 高效性
在同一 PCR 反应管内同时检出多种核酸片段，或对有多个型别的目的基因进行分型，特别是用一滴血就可检测多种病原体。
(2) 系统性
多重数字 PCR 很适宜于成组核酸片段的检测，如肝炎病毒，肠道致病性细菌，性病，无芽胞厌氧菌。
(3) 经济简便性
多种核酸片段在同一反应管内同时检出，节省时间、试剂耗材和经费，为临床提供更多更准确的检测信息。
图 8
如图 8 所示，官网显示目前可在一个孔中实现六重检测。可进行液滴可视化质量控制及溯源分析，可追踪精确到单个液滴图像。如图 9 所示显示蓝色采集通道中液滴的放大图。
图 9
液滴可作为生物样本的单分子扩增容器，实现核酸、细菌、病毒颗粒等均一无偏差放大和检测。如何在生物样本回收过程中避免破乳过程对生物样本的影响，实现生物样本简单高效回收是一大技术难点。Naica 系统满足微滴内 PCR 产物回收功能。
视频 1
Naica 全自动液滴芯片数字 PCR 仪操作流程如视频 1 所示。液滴微流控技术在生物颗粒的精确定量与快速检测方面独具优势，已成为近年来微流控技术的主流科研热点。
图 10
由于具有重现性好、混合速度样品与试剂的消耗量少、易于精确操控等特性，在生物医学尤其药物控释、病毒检测、颗粒材料合成等领域中均有重要应用，显著提高了人们对生物体系进行高通量筛选的能力。
视频 2
Stilla CEO 对数字 PCR 技术的未来展望如视频 2 所示。
[1] Stilla官网 &&深蓝云生物科技官网.
[3] https://wiki.antpedia.com/duozhongshuzijishujieshao-2353654-newsIVD从业者网
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