细胞株构建的具体步骤及流程

细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系获得的具有特殊性质的细胞。因此,欲构建细胞株,首先需获得稳定的细胞系。构建流程如下:

1.   细胞培养(原核:大肠杆菌,真核:CHO细胞)

2.   质粒的瞬时转染。

3.   向转染后的细胞培养基中加入抗生素规定浓度的抗生素进行稳定细胞株筛选。

4.   Western blot或ELISA检测蛋白的表达情况,筛选最高克隆进行传代并保存。

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