树鼩手足口病模型构建技术原理
柯萨基病毒A16(CA16)通常认为是人类手足口病的主要病原体之一。手足口病的临床表现包括幼儿手、足、口小囊泡和严重的炎症性的中枢神经系统损害。在该项研究中,利用实验CA16感染树鼩来研究CA16的发病机制。
实验动物:15只健康雌性树鼩(80+10g,2月龄)随机分成感染组(n=12)及模拟感染对照组(n=3).所有实验规程都通过云南省实验动物管理办公室批准,所有动物都根据中国医学科学院生物医学研究所实验动物委员会(CMAS)的方针政策单独饲养。所有个体在此之前都通过中和试验证明没有CA16抗体。
实验方法:实验组树鼩通过鼻腔喷雾由呼吸道感染CA16(104.5 CCID50),对照组使用生理盐水喷雾模拟,为未感染的阴性对照。每天监测树鼩,并在感染后的2天通过数字温度计棒(MCBOMR,欧姆龙公司)测量直肠体温,同时,取EDTA包被的毛细管静脉血样品作日常常规的生物对病毒载量检测(兽医多物种血液系统,Hemavet950FS,德鲁科技有限公司),所有组织和器官的病原学及组织病理学检测在树鼩被麻醉处死的第4、7、10和14天进行。
结果表明,被CA16感染的树鼩体温以及血嗜中性粒细胞与单核细胞的百分比在感染后4—7天均升高,不同组织和粪便的CA16动态分布在各个感染阶段都能找到,不仅如此,还能观察到中枢神经系统和其他器官的病理病变。该项研究表明树鼩能够作为研究CA16感染的良好的动物模型。
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